PROCEDIMIENTO CORTE A MANO ALZADA

Fig 1. Tincion con Fast Green

Fig 2. Diferentes colorantes

Materiales:

- Muestra de la planta a trabajar que este fresca

- Cuchilla minora nueva para que el corte sea lo más impecable posible.

- Placas

- Cubreobjetos

- Colorantes Safranina, Fast-green,

- Glicerina

- Agua destilada

Metodos:

1. Se lava la parte de la planta a la cual se le vaya a realizar la coloración y la respectiva observación.

2. Realizar los cortes con la cuchilla nueva, bajo el estereoscopio para poderlos realizar con precision.

3. Tratar de mantener humeda la muestra con un poco de agua destilada mientras se realiza el corte ya que la luz del estereoscopio hace que la muestra se vaya deshidrtando y se queme.

4. una vez realizado el corte, proceder a tenir con Safranina o Fast-Green y dejar actuar el colorante durante 1 minuto.

5. Pasado el minuto de la coloración lavar cuidadosamente con agua destilada para quitar el exceso de colorante.

6. Una vez retirado el exceso de colorante y de haber secado con una toallita de papel el exceso de agua, añadir 1 gota de glicerina.

7. Cuando ya tenga glicerina la muestra, cubrir con cubreobjetos y observar al microscopio.

Nota: esta tecnica es muy eficiente para las diferentes practicas que se realizan semanalmente en los laboratorios, ya que es rápida y nos permite ver casi de forma inmediata lo que se esta viendo en la teoria. Para los cortes de plantas que realizamos en la materia de Histo-morfología vegetal, tuvimos que tener en cuenta que las plantas escojidas para el trabajo de todo el semestre no fueran leñosas ya que esto dificultaria mucho los cortes con la cuchilla.

TECNICAS HISTOLOGICAS EN VEGETALES

Fig. 1 Diferentes recipientes que contenian alcoholes para la deshidatacion



Fig. 2. Horno donde se calientan las muestras para la incubacion



Fig. 3. Corte al microtomo

Fijación en: Solución en AFA

- 85 c.c de alcohol al 80%
- 10 c.c de formol al 37-40%
- 5 c.c de ácido ácetico glacial
- Tiempo de fijación 24 horas como mínimo

Ventajas: Preserva la mayoría de las estructuras celulares en casi todas las plantas jóvenes, compatible con la mayoría de los colorantes y se puede pasar del fijador al primer alcohol.

Desventajas: No se puede guardar permanentemente en el fijador AFA, lo mejor es guardarlo en alcohol etílico al 70% no es recomendado para tejidos meristemáticos y tejidos donde queramos ver mitosis y cromosomas.

Deshidratación: Deshidratación con alcoholes ascendentes: Alcohol 70º-80º-90º 100% I, 100%II, 100%III. Si el `proceso es manual dejar el tejido 24 horas en cada alcohol y como mínimo 12 horas.

Aclaramiento: Xilol I y Xilol II, 6 horas en cada uno (el xilol endurece los tejidos vegetales en especial el tejido leñoso). En remplazo del xilol utilizamos alcohol butílico terciario o terbutanol que se calienta al baño de maria para diluirlo.

1. Terbutanol 1 parte por 3 de alcohol etílico al 100%

2. Terbutanol 2 partes con 2 de alcohol etílici al 100%

3. Terbutanol 3 partes con 3 de alcohol étílico al 100%

4. Terbutanol puro.

Seis horas en cada uno de los cuatro pasos a una temperatura de 37ºc

Inhibición: De xilol a pararafina I, parafina II, 12 horas en cada una. (temperatura 53º, 56) si es con terbutanol una parte de terbutanol y una parte de parafina a una temperatura de 30º a 40º; temperatura de la parafina (53º 56º) hasta que el terbutanol se evapore, y colocamos el tejido vegetal en parafina pura hasta por 72 horas, hasta que no huela más a terbutanol.

Inclusión: En parafina donde se coloca el tejido vegetal según la orientación del corte en moldes plásticos.

Corte al micrótomo: El corte al microtomo se realizo de 15 micras, que se toman en el portaobjetos en el flotador de tejidos y se llevan a un horno incubadora a una temperatura de 37º a 40º por 12 horas.

Coloración: Safranina 4 gr, Methyl celloselve, Ethanol 50% 200 c.c, acetato de sodio 4 gr, Formol puro 8 c.c.

Disolver la safranina en el metíl celloselve en un agitador magnético y agregamos los otros componentes en el mismo orden. Tiempo de tinción en la safranina o por 12 horas, las hojas mayor tiempo. Lavar con agua corriente muy suave.

Alcohol ácido pícrico solución saturada

Alcohol I de 70º, 80º, y 90º.

Fast green FCTCI42053

Solución madre de Fast- Green: Fast-green FCT 3 gr, etanol absoluto 50 c.c y metil celloselve 50 c.c y los 3 gr de Fast-green FCT.

Solución de trabajo: Fast-green FCT 1 parte y 3 partes de esencia de clavos; agregar safranina al gusto por un minuto. Deshidrataciones con alcoholes ascendentes aclarar en xilol y montar con resina.

EPIDERMIS VEGETAL Y TRICOMAS

Fig.1.


Fig.2.


Fig.3.

Fig. 1, 2, 3. Corte transversal de hoja. Aumento 40X. Tinción con Fast-Green. En la fig. 1, tenemos células de epidermis bien definidas. Fig.2. Tenemos una traqueida o pelo bien definido. Fig.3. Tenemos una traqueida bien definida con tinción de safranina y se alcanza a visualizar un poco la epidermis.

Descripción histologica. La epidermis está formada por una capa de células. La epidermis protege las estructuras primarias de todo tipo de plantas, sean herbáceas o leñosas. Las células son de forma rectangulares como la de la fig.3, y otras isodiametricas como las que se encontraron en la Fig.1. Son vivas y semejantes por su contenido a las células parenquimaticas, ya que poseen gran cantidad de vacuolas, con carencia de cloroplastos. Los tricomas siendo extenciones epidermicas, tienen una forma alargada, definiendose como pelo alargado simple pluricelular el cual esta formado por columnas de varías células dispuestas una a continuación de otra. Tricoma que sobresale del resto de estructura, su cabeza es redonda al parecer unicelular donde se acumulan las sustancias, bordeado por una membrana o película de cutina; al parecer la sustancia se acumula entre la pared celular y la cutícula, ocupando un amplio espacio, se observa claramente el pedúnculo que permite la unión entre la cabeza y la epidermis ( pluricelular ) ; por estas características podríamos decir que este tricoma corresponde a un secretor de mucilago en donde la liberación de la sustancia se acumulada se da a través del rompimiento de la cutícula

TEJIDO DE SOSTEN Y VASCULARES

Fig. 1 . Corte transversal de tallo aumento 40x. Tinción con Safranina (la de color rojo), y Fast-Green (la de color verde). 1. Epidermis, 2.Parenquima, 3.Xilema, 4. Floema. Fotografía tomada por Solanyi Álvarez, Facultad de Bilogía, área de histo-morfología vegetal, Universidad el Bosque.

Descripción histológica. El xilema contiene un conjunto de células redondeadas organizadas en filas de gran tamaño, este xilema cumple funciones de transporte de sustancias minerales desde la raíz a todas partes de la planta. El floema esta constituidos por células redondeadas de menor tamaño y con menos espacios intercelulares (ver figura 1 ítem 4). En la tinción con fast-Green se observa claramente la disposición de las células en el corte, que son dirigidas hacia abajo unas debajo de otras. En la tinción con safranina se ve la misma epidermis delgada y no se distingue claramente en la parte superior el xilema y el floema.

Dentro de este corte se hizo una observación general ya que se observo lo mismo dentro de las dos tinciones, Comenzando con la descripción histológica del corte de afuera hacia adentro se observa:

una epidermis bien diferenciada con células grandes, con gran presencia pelos, justo debajo de la epidermis se hace observables las células parenquimatosas de relleno, junto a ellas las fibras del esclerénquima, las cuales poseen un aspecto de media luna y cada una se encuentra separada de la otra por espacios pequeños ; siguiendo así con la descripciones se observa junto a las fibras del esclerénquima las células son vasculares xilema y floema, en donde las del xilema presentan un tamaño mayor a las del floema, se encuentran intercalados, y su disposición es radial, formando detalladamente el cilindro vascular.

Por último en la parte más interna de el tejido son observables las células del colénquima con su forma globosa, gran tamaño y paredes celulares bien diferenciadas. La comparación con respeto a lo visto en clase y lo visto en laboratorio se observa una gran semejanza en cuanto a las fibras del esclerénquima y sus componentes anexos así mismo se puede determinar con certeza la clase de tejido que se esta observando gracias a la buena observación y obtención del tejido y a las fuentes bibliográficas prestada por parte del profesor.

En el corte longitudinal de tejido se logro observar de izquierda a derecha:

una colénquima muy bien definida, con sus paredes igualmente definidas rodeado por traqueidas de forma alargada y delgada de células visiblemente lignificadas paredes primaria y secundaria por lo general sin perforaciones.

traqueidas de forma alargada y aguda, con una disposición ordenada entre traqueidas, se encontraban entre el colénquima y alrededor de el
se observan también dos hileras de tejido colenquimatoso con sus células grandes globosas, y con paredes definidas.

En los cortes observados en el laboratorio, no posee variedad de traqueidas, como anilladas, espiraladas escaleriformes, entre otras, a diferencia de la vista en clase donde la variedad de traqueidas, en la imagen del xilema es notable. Los tejidos vasculares y de sostén son observables en el tallo puesto que están distribuidos a lo largo de todo el vegetal, en todos los órganos y estructuras. En cuanto a la función en el caso del xilema es Transportan nutrientes, agua, hormonas y minerales dentro de la planta. El floema Transporte de agua y sales, acumulación de reservas. Y los tejidos de sostén; Sostén de plantas jóvenes y herbáceas. (Órganos en crecimiento).

COMPARACION TEJIDO MERISTEMATICO Y PARENQUIMATICO

Fig. 4 Tejido meristemático. Definicion clara de las celulas que lo conforman. Imagen tomada de

Descripción histológica. Dentro de este corte se hizo una observación general ya que se observo lo mismo dentro de las dos tinciones, pero de lo cual se observa algunas diferencias en cuanto a la organización y algún tipo de células.

Se observa células pocos nucleadas, parénquima de empalizada sin ningún otro tipo de tejido parenquimatico, dentro de unos de los cortes se observa el parénquima de empalizada un poco desordenado ya que no se encuentra de la misma forma ordenada como lo muestra el otro corte, sus células son poco nucleadas y de forma alargadas, se observa células de epidermis las cuales son de forma ovaladas y grande a diferencia del parénquima de empalizada que son alargadas.
Dentro de las células del parénquima de empalizada se encuentran grandes espacios intercelular, a esto se le agrega que se observo dentro de unos de los cortes un grupo de células anexas que por sus características y su función nos da a entender que pertenecían a algún tipio de células de tejido vascular.

Este tipo de tejido el cual le brinda a la planta toda la parte fotosintética es de gran importancia ya que también le proporciona alimento y todos los nutrientes y demás compuesto a la planta.
De acuerdo a lo visto en clase y lo observado dentro del laboratorio se va claramente la similitud que se observa en los tejido y cortes, lo visto dentro del laboratorio es demasiado semejante a lo visto en clase por esta razón no encontramos ningún factor o alguna característica que nos ayuden a diferenciarlo o a crear en esto semejanzas.

CORTE DE PAPA. OBSERVACION DE AMILOPLASTOS

Fig. 4 Papa. Corte de aumento 40x. Tinción con lugol. 1. Amiloplastos, 2. Limite entre las células Fotografía tomada por Solanyi Álvarez, Facultad de Bilogía, área de histo-morfología vegetal, Universidad el Bosque.

Descripción histológica. En la figura cuatro tenemos un corte de papa en donde se puede observar claramente los elementos de reserva de energía, en este caso los amiloplastos. Estos amiloplastos en su contenido tienen gránulos de almidón que almacenan amilopectinas para la polimerización de la glucosa. Su forma es ovalada y se ven de este color gracias a la tinción con lugol.

CORTE TRNSVERSAL DE HOJA

Fig. 1 Planta de fresa. Corte de hoja desde el ápice a la base aumento 40x. Tinción con safranina. 1. Epidermis, 2.Parenquima en empalizada. Fotografía tomada por Solanyi Álvarez, Facultad de Bilogía, área de histo-morfología vegetal, Universidad el Bosque.

Fig. 2 Planta de fresa. Corte de hoja desde el ápice a la base aumento 40x. Tinción con fast-Green. 1. Epidermis, 2.Parenquima en empalizada. Fotografía tomada por Solanyi Álvarez, Facultad de Bilogía, área de histo-morfología vegetal, Universidad el Bosque.

Descripción histológica. Como podemos observar en la figura 2, 3, se ve una capa de epidermis muy delgada la cual es seguida por un parénquima en empalizada de células largadas, en la tinción con fast-Green se observa claramente la disposición de las células en el corte, que son dirigidas hacia abajo unas debajo de otras o desordenadas. En la tinción con safranina se ve la misma epidermis delgada y no se alcanza a distinguir claramente la forma de las células, solo se observan algunos limites celulares que nos permiten diferenciar el tejido. Dentro de este corte se hizo una observación general ya que se observo lo mismo dentro de las dos tinciones, pero de lo cual se observa algunas diferencias en cuanto a la organización y algún tipo de células.

Se observa células pocos nucleadas, parénquima de empalizada sin ningún otro tipo de tejido parenquimatico, dentro de unos de los cortes se observa el parénquima de empalizada un poco desordenado ya que no se encuentra de la misma forma ordenada como lo muestra el otro corte, sus células son poco nucleadas y de forma alargadas, se observa células de epidermis las cuales son de forma ovaladas y grande a diferencia del parénquima de empalizada que son alargadas. Dentro de las células del parénquima de empalizada se encuentran grandes espacios intercelular, a esto se le agrega que se observo dentro de unos de los cortes un grupo de células anexas que por sus características y su función nos da a entender que pertenecían a algún tipio de células de tejido vascular.

Este tipo de tejido el cual le brinda a la planta toda la parte fotosintética es de gran importancia ya que también le proporciona alimento y todos los nutrientes y demás compuesto a la planta. De acuerdo a lo visto en clase y lo observado dentro del laboratorio se va claramente la similitud que se observa en los tejido y cortes, lo visto dentro del laboratorio es demasiado semejante a lo visto en clase por esta razón no encontramos ningún factor o alguna característica que nos ayuden a diferenciarlo o a crear en esto semejanzas.

La fresa

TAXONOMIA

Nombre común o vulgar: Fresa, Fresas, Fresón, Fresones, Frutilla, Frutillas, Fresal, Fresera, Amarrubia, Madroncillo, Mayueta
Nombre científico o latino: Fragaria vesca
Familia: Rosáceas (Rosaceae).

CARACTERISTICAS GENERALES
También denominada fresilla, por su diminuto tamaño ó fresa del bosque atendiendo a su origen como fruto silvestre que nace entre la maleza en las laderas montañosas. Hoy en día, sin embargo, las comercializadas son fresas de cultivo intensivo que con la ayuda de invernaderos consiguen tener presencia todo el año en el mercado español.Fruto de muy escaso tamaño, en forma redondeada o cónica y color rojo brillante. Su pulpa es mantecosa, deshaciéndose en la boca a la más mínima presión, con un sabor extremadamente dulce. Pero lo que más caracteriza a la fresa es su aroma intenso, capaz de impregnar con su perfume penetrante, varios metros a la redonda.

HISTORIA
Todas las fresas cultivadas se obtuvieron a partir de cuatro especies principales. La primera de ellas, la fresa silvestre o de bosque, es una especie frágil nativa de las montañas de América y las Antillas. La fresa escarlata o fresa de Virginia es nativa del este de América del Norte y se introdujo en Europa durante el siglo XVII. La fresa de playa o fresa de Chile procede de las regiones montañosas del hemisferio occidental. La última especie se parece a la fresa silvestre, común en Europa central, dio origen por hibridación a las variedades europeas de frutos más gruesos llamados fresones.

¿DONDE LA ENCONTRAMOS?
La fresa es nativa de las regiones templadas de todo el mundo y se cultiva en grandes cantidades, tanto con fines comerciales como por parte de horticultores aficionados.La fresa de Aranjuez ha alcanzado una justa fama nacional, pues es superior a todas en aroma y gusto.

CULTIVO

En zonas frías, las fresas suelen plantarse al principio de la primavera, y a mediados de verano o más tarde en los lugares más calurosos. Las plantas forman el fruto en la primavera del año siguiente.Hay variedades que producen en otoño una segunda cosecha de frutos más pequeños. (Tomado de http://www.redondofrutas.com/Html/NuestrosProductos/Fresa.html)